Сорбционные свойства мха по отношению к микроорганизмам и тяжелым металлам
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 2.1. Методы исследований 2.1.1. Получение микробной суспензии Питательный агар, который готовится согласно прописи, заливают предварительно по 5-10 мл в пробирки, которые оставляют наклонными в специальном штативе до полного застывания среды. Бактериологической петлей отбирают клетки микроорганизмов и вводят петлю в пробирку со скошенным агаром до дна. Слегка касаясь бактериологической петлей поверхности среды, проводят от дна пробирки вверх зигзагообразную линию, тем самым, засевая культуру микроорганизмов. После посева пробирки помещают в термостат (30°С) на 1 сутки (по истечению этого срока пробирки извлекают из термостата) и заливают в них по 2.0-3.0 мл физиологического раствора (ФР). Осторожно отделяют микробную культуру от агара постепенным встряхиванием и покачиванием пробирки. Полученную суспензию хранят в холодильнике. 2.1.2. Определение количества жизнеспособных клеток методом высева на плотную среду Микробную суспензию разводят в стерильном физиологическом растворе, при этом используя один и тот же коэффициент разведения. Посев осуществляют из 5-ого, 6-ого и 7-ого разведений перенося 0, 1 мл суспензии на поверхность питательного агара в чашках Петри. Затем суспензию равномерно распределяют шпателем по питательному агару. Высев из каждого разведения осуществляют стерильной пипеткой. После посева чашки помещают в термостат (30°С) на сутки. Количество жизнеспособных клеток в 1 мл суспензии рассчитывают по следующей формуле: M=a * 10z/ V; ( 2.1 ) БГТУ 02.00.ПЗ Изм. Кол.уч. Лист № док. Подпись Дата Разраб. Ковалевич А. Экспериментальная часть Стадия Лист Листов Пров. 1 18 Консульт. БГТУ 7140607 2004 Н.контр. Утв. где M - количество клеток в 1 мл исходной суспензии; а - количество колоний, которые выросли на чашках Петри; Z - порядковый номер разведения суспензии; V - объем суспензии, взятой для высева на чашку Петри, мл. Величину оптической плотности измеряют с помощью фотоколориметра ФЭК-56М. Для измерения светорассеяния выбирают светофильтр, который обеспечивает максимум пропускания света данной суспензией. В результате опытов получили, что максимум пропускания света обеспечивает длина волны 540 нм. 2.1.3 .
Похожие работы
- Практические занятия