рДНК-биотехнология. Способы биотрансформации клеток

СОДЕРЖАНИЕ Введение 1 Основные группы ферментов генетической инженерии 1.1 Рестриктазы 1.1.1 Механизм действия рестриктаз 1.1.2 Построение рестрикционных карт 1.3 Лигазы 2 Введение нового гена в клетку 2.1 Регуляция экспрессии гена у прокариот 2.2 Способы прямого введения гена в клетку 2.3 Введение генов в клетки млекопитающих 2.4 Генетическая трансформация соматических клеток млекопитающих 2.5 Генотерапия 2.6 Получение трансгенных

животных Заключение Список литературы Введение Генетическая инженерия - конструирование in vitro функционально активных генетических структур (рекомбинантных ДНК), или иначе - создание искусственных генетических программ (Баев А. А.). По Э. С. Пирузян генетическая инженерия - система экспериментальных приемов, позволяющих конструировать лабораторным путем (в пробирке) искусственные генетические структуры в виде так называемых

рекомбинантных или гибридных молекул ДНК. Речь идет о направленном, по заранее заданной программе конструировании молекулярных генетических систем вне организма с последующим введением их в живой организм. При этом рекомбинантные ДНК становятся составной частью генетического аппарата рецепиентного организма и сообщают ему новые уникальные генетические, биохимические, а затем и физиологические свойства. Цель прикладной

генетической инженерии заключается в конструировании таких рекомбинантных молекул ДНК, которые при внедрении в генетический аппарат придавали бы организму свойства, полезные для человека. Технология рекомбинантных ДНК использует следующие методы: - специфическое расщепление ДНК рестрицирующими нуклеазами, ускоряющее выделение и манипуляции с отдельными генами; - быстрое секвенирование всех нуклеотидов очищенном

фрагменте ДНК, что позволяет определить границы гена и аминокислотную последовательность, кодируемую им; - конструирование рекомбинантной ДНК; - гибридизация нуклеиновых кислот, позволяющая выявлять специфические последовательности РНК или ДНК с большей точностью и чувствительностью, основанную на их способности связывать комплементарные последовательности нуклеиновых кислот; - клонирование ДНК: амплификация in vitro с