Молекулярные механизмы многообразия антител — страница 8

  • Просмотров 960
  • Скачиваний 16
  • Размер файла 82
    Кб

структурных областей, относи­тельно константны. Эти данные позволяли предсказать, что антиген-связывающий участок образуют всего лишь 5-10 аминокислот каждой гипервариа­бельной области. Это предсказание было впоследствии подтвер­ждено рентгеноструктурным анализом антител. 2. Молекулярные механизмы многообразия антител После ознакомления с тем фактом, что громаднейшее разнообразие антител является необходимым

условием правильного функционирования защитной системы организма, рассмотрим обеспечивающие это условие механизмы. Каждая L- и Н-цепь кодируется более чем одним генным сегментом Участие необычных генетических механизмов в образовании антител стало очевидным задолго до того, как стало ясно, какой вклад вносят эти механизмы в разнообразие антиген-связывающих участков. Как уже говорилось изучение аминокислотных

последовательностей миеломных белков показало, что каждая цепь иммуноглобулина состоит из вариабельной (V) и констант­ной (С) областей, и тогда возник вопрос: как такие цепи кодируются в гено­ме? Уже в то время предполагали, что V- и С-области каждой из цепей могут кодироваться двумя отдельными генами, которые каким-то образом соеди­няются перед экспрессией. Первые прямые данные о перестройке ДНК в процессе развития В-клеток

были получены в 1976 г. в экспериментах, в которых ДНК из ранних мы­шиных эмбрионов, неспособных к выработке антител, сравнивали с ДНК из клеток мышиной миеломы, вырабатывающих антитела. Эти два вида ДНК переваривали рестрикционной нуклеазой и полученные фрагменты гибридизо-вали с радиоактивными последовательностями ДНК, приготовленными пу­тем копирования in vitro V- или С-последовательности молекул информа­ционной РНК для

L-цепей, выделенной из клеток миеломы. Как показали результаты этих опытов, специфические V- и С-кодирующие по­следовательности находились у эмбрионов в разных рестрикционных фраг­ментах ДНК, а в клетках миеломы – в одном и том же рестрикционном фраг­менте. Таким образом, у зародыша, где гены иммуноглобулинов не экспрессируются, последовательности ДНК, кодирующие V- и С-области той или иной цепи, локализуются в различных

участках генома; между тем в клетке миеломы, где уже образуются цепи иммуноглобулинов, эти две по­следовательности соединены вместе. Сейчас известно, что для каждого типа цепей иммуноглобулинов –легких цепей х, легких цепей λ и тяжелых цепей – существует отдельный «пул» (об­ширная группа) генов, которые могут быть использованы при синтезе каждой отдельной полипептидной цепи. Каждый такой пул содержит набор раз­личных