Метод фиксации потенциала

  • Просмотров 513
  • Скачиваний 14
  • Размер файла 31
    Кб

Метод фиксации потенциала План Эксперимент с фиксацией потенциала Емкость и ток утечки Токи ионов натрия и калия Избирательные яды для натриевых и калиевых каналов Зависимость ионных токов от мембранного потенциала Инактивация натриевого тока Натриевая и калиевая проводимость как функция потенциала Количественное описание натриевой и калиевой проводимостей Реконструкция потенциала действия Эксперимент с фиксацией

потенциала Метод фиксации потенциала (voltage clamp) был разработан Колем и его коллегами, и усовершенствован Ходжкином, Хаксли и Катцем. Все, что нам необходимо знать для того, чтобы понять сами эксперименты, это то, что метод позволяет практически мгновенно установить нужный уровень мембранного потенциала и зафиксировать его на этом уровне, измеряя при этом мембранный ток. Ток, протекающий через мембрану при скачкообразном

изменении потенциала с уровня покоя (–65 мВ) на деполяризованный уровень (–9 мВ). Ток, возникающий в ответ на скачок потенциала, имеет три стадии: (1) короткий выброс выходящего тока, длящийся всего несколько миллисекунд, (2) ранний входящий ток (3) поздний выходящий ток. Емкость и ток утечки Первоначальный кратковременный выброс тока представляет собой емкостной ток, обусловленный изменением заряда на мембране в результате

изменения мембранного потенциала. Если усилитель обратной связи способен проводить большие токи, то емкостной ток длится очень недолго. На практике выброс емкостного тока длится около 20 мс, и за ним следует небольшой, но устойчивый выходящий ток. Этот выходящий ток, протекающий через проводимости, активные при потенциале покоя, называется током утечки. Большей частью это ток ионов калия и хлора, который имеет линейную

зависимость от величины смещения потенциала фиксации от потенциала покоя и наблюдается на всем протяжении скачка потенциала. Большую часть времени, однако, этот ток замаскирован другими, гораздо большими по величине ионными токами. Токи ионов натрия и калия Ходжкин и Хаксли показали, что вторая и третья стадии тока обусловлены сначала входом ионов натрия, а затем выходом ионов калия из клетки. Им также удалось выделить