Исследование токсического и генотоксических эффектов синтетических пищевых красителей методом Allium test — страница 2

  • Просмотров 657
  • Скачиваний 16
  • Размер файла 110
    Кб

глюкозы; желатин; регуляторы кислотности (лимонная кислота, цитрат натрия); ароматизатор идентичный натуральному; пищевые красители: красный (Красный Очаровательный АС - E129), оранжевый (Желтый «Солнечный закат» - E110), желтый (Тартразин - E102), зеленый (Зеленый S - E142), синий (Бриллиантовый Голубой FCF - E133), белый (Диоксид титана - E171). Для изучения действия пищевых красителей был выбран Allium test, который рекомендован экспертами Всемирной

организации здравоохраниения как стандарт в цитогенетическом мониторинге окружающей среды. Результаты, полученные в данном тесте, хорошо коррелируют с результатами тестов на клетках млекопитающих и человека (корреляция до 82 %) [5, 6]. Объектом исследования в данном тесте является меристема проростков корешков лука посевного - Allium cepa сорта Штут- гартен-Ризен [2, 6, 7]. Ряд авторов рекомендует использовать Allium test для изучения

токсического, митозмодифицирующего и мутагенного действия пищевых добавок [8, 9]. Например, генотоксичность тартразина уже исследовалась в Allium test [8]. Выбранная растительная тест-система экономична, так как на ней (в отличие от микроорганизмов) можно регистрировать все типы генетических повреждений: геномные, хромосомные, генные. Она позволяет выявлять как мутагены, непосредственно повреждающие ДНК, так и промутагены, то есть

факторы генетически безопасные, но приобретающие мутагенную активность в процессе метаболизма в организме [2]. Постановка опыта Брали навеску в 1 г сахарного драже каждого цвета и растворяли в 100 мл дистиллированной воды (концентрация 1 %). Готовили вторую концентрацию 0,2 % (0,2 г на 100 мл воды). Таким образом, получилось шесть пар растворов разных цветов, или 12 опытных вариантов. Луковицы A. cepa помещались в стаканчики на 25 мл с

растворами драже. Всего было поставлено четырнадцать вариантов опытов, различающихся по типу (цвету) красителя и концентрации, включая два контрольных варианта: контроль на дистиллированной воде и на 1 % растворе сахара в дистиллированной воде, чтобы проверить действие сахара на корневые меристемы A. cepa. Для каждого варианта использовали повторности в соответствии с рекомендациями современного стандарта на проведение

экспериментов по методу Allium test (по три луковицы для каждого варианта) [5]. Луковицы проращивали 4 дня. Затем у каждой луковицы корни срезали под основание донца. 1. Для оценки токсического действия определяли длину корней. Изменение длины корней в Allium test является показателем токсичности изучаемого фактора и используется в качестве краткосрочного скриннинг-теста [6]. Данный тест можно проводить в широком диапазоне рН (3,5-11), в