Исследование процесса физиологической адаптации бактерий к тяжёлой воде — страница 9

  • Просмотров 483
  • Скачиваний 15
  • Размер файла 130
    Кб

гидролиза биомассы. Табл. 3 Качественный и количественный состав аминокислот, выделенных из белковых гидролизатов B. methylicum Аминокислота Содержание в белке, % от сух. веса 1 г биомассы протонированный гидролизат гидролизат, полученный 98% 2H2О и 2% [U-2Н ]метанола Глицин 8.03 9.69 Аланин 12.95 13.98 Валин 3.54 3.74 Лейцин 8.62 7.33 Изолейцин 4.14 3.64 Фенилаланин 3.88 3.94 Тирозин 1.56 1.82 Аспарагиновая кислота 7.88 9.59 Глутаминовая кислота 11.68 10.38 Лизин 4.37 3.98 Гистидин

3.43 3.72 Треонин 4.81 5.51 Метионин 4.94 2.25 Аргинин 4.67 5.27 Вследствие того, что используемые в работе бактериальные штаммы были представлены их ауксотрофными по определенным аминокислотам формами, было необходимо оценить сколько данных аминокислот содержится в гидролизатах биомассы и каковы уровни их дейтерированности. В гидролизате биомассы, полученной с 2H2O-среды было зафиксировано небольшое снижение содержания лейцина,

изолейцина, глутаминовой кислоты, лизина и метионина по сравнению с биомассой, полученной на обычной воде (табл. 3). Содержания аланина, аспарагиновой кислоты, треонина и аргинина в дейтерированном белке, напротив, немного превышают контрольные показатели, снятые в Н2О. Таким образом, достигнутый результат в опытах по адаптации B. methylicum к 2H2О, позволил использовать гидролизаты его (2Н)меченой биомассы, полученной в ходе

многоступенчатой адаптации к 2H2О в качестве ростовых субстратов для выращивания бацилл Bacillus subtilis, а также штамма галофильных бактерий Halobacterium halobium. При этом, показателем, позволяющим надеяться на высокую эффективность включения дейтерия в продукты, синтезируемыми данными бактериальными штаммами, служит высокий уровень дейтерированности аминокислот суммарного белка этих бактерий, измеренный на метиловых эфирах

DNS-производных аминокислот, за исключением лейцина и метаболически родственных с ним аминокислот, сниженные уровни дейтерированности которых объясняются эффектом ауксотрофности данного метилотрофного штамма в лейцине (табл. 4). Табл. 4 Уровни дейтерированности аминокислот суммарных белков B. methylicum, полученных в ходе многоступенчатой адаптации к 2H2O Метиловые эфиры дансилпроизводных аминокислот Величина молекулярного иона

(М+) Количество включенных атомов дейтерия Уровень дейтерированности аминокислот, % Dns-Gly-OMe 324.0 1.8 90.0 Dns-Ala-OMe 340.3 3.9 97.5 Dns-Val-OMe 368.5 4.0 50.0 Dns-Leu-OMe (Dns-Ile-OMe) 383.4 4.9 49.0 Dns-Phe-OMe 419.6 7.6 95.0 Dns-Tyr-OMe 668.5 6.5 92.8 Dns-Ser-OMe 354.8 2.6 86.6 Dns-Thr-OMe - - не определяли Dns-Met-OMe - - не определяли Dns-Asp-OMe 396.4 2.0 66.6 Dns-Glu-OMe 411.0 3.5 70.0 Dns-Lys-OMe 632.4 5.3 58.9 Dns-Arg-OMe - - не определяли Dns-Нs-OMe - - не определяли Адаптация бацилл B. subtilis. В следующих опытах была исследована способность к росту на 2H2О бациллярного