Исследование бактерий по почвенному профилю дерновой альфегумусовой глеевой почвы — страница 3

  • Просмотров 874
  • Скачиваний 18
  • Размер файла 42
    Кб

почвенного разреза. Глубина 25 – 45 см, преобладающий цвет светло-бурый с многочисленными охристыми, сизыми и голубыми затеками и пятнами; до глубины 45 см заметны затеки гумусового вещества; горизонт плотного сложения, сильно увлажнен; механический состав определяется как легкоглинистый; образец взят из глеевого горизонта почвенного разреза. Глубина 45 – 70 см, цвет темно-серый, присутствуют кирпично-красные включения; горизонт

более уплотнен, с глубины 70 см просачивается вода. Подготовку почвенных образцов проводили согласно существующим рекомендациям [7]. Почву высыпали на сухое стекло, тщательно перемешивали и раскладывали ровным слоем. Пользуясь пинцетом, удаляли мелкие корешки и другие посторонние включения. Из разных мест рассыпанной почвы отбирали небольшие порции и взвешивали на технических весах по 1 г почвы из каждого горизонта. Для

разрушения почвенных агрегатов и десорбции клеток микроорганизмов с почвенных частиц, каждую навеску почвы вносили в отдельную колбу, содержащую 100 мл стерильного физиологического раствора (0,5% раствор хлорида натрия). Колбы встряхивали на качалке в течение 30 минут. Определение общей численности бактерий в почве Общее количество бактерий в почве учитывали прямым счетом на фиксированных окрашенных мазках (метод

Виноградского-Брида) [6;7]. Пять предметных стекол обезжиривали и на каждом обводили карандашом по стеклу квадрат со стороной 15 мм. Бактериальную суспензию объемом 0,1 мл из соответствующей колбы наносили на стекло и равномерно распределяли по площади квадрата. Препараты подсушивали на воздухе, фиксировали в пламени спиртовки (проносили над пламенем 2 – 3 раза) и окрашивали 2 минуты фуксином. Краситель сливали, препарат промывали

и высушивали между полосками фильтровальной бумаги. Подсчитывали количество клеток, используя световой микроскоп марки «Биолам» с масляной иммерсионной системой при увеличении 10×1,0×100. Для прямого счета микробных клеток вставляли в окуляр микроскопа сеточку Гаженко, 9 маленьких квадратиков которой составляют поле зрения. Просматривали 15 полей зрения. Общую численность бактерий в 1 г почвы (Nобщ.) определяли по формуле: S × Σni N

общ. = z× s×v ×100 [кл/г], где S – общая площадь окрашенного на стекле препарата (225 мм2); Σni – сумма подсчитанных под микроскопом микробных клеток; z – количество просмотренных полей зрения (15); s – площадь одного поля зрения (1089×10-6 мм2); v – объем образца воды, затраченный на приготовление окрашенного препарата (0,1 мл); 100 – разведение первоначального образца почвы в 100 раз. Опыт проводили в двухкратной повторности, чтобы рассчитать