Хламидиоз. Методы определениядиагностики — страница 10

  • Просмотров 3619
  • Скачиваний 187
  • Размер файла 28
    Кб

температуре + 4 ° С (в общей камере бытового холодильника) в течение 2-х месяцев. Состав транспортной среды: среда MEM с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота и антибиотика гентамицина концентрации 50 мкг/мл . Клинический материал после перенесения в транспортную среду хранится в общей камере холодильника при температуре + 4 ° С и, в течение двух суток должен быть доставлен в лабораторию. Процедура посева 1. Обработка

однодневной клеточной культуры МсСоу 1% раствором ДЕАЕ декстраном в течение 30 минут. 2. Заражение обработанных клеток материалом, полученным от больных. 3. Центрифугирование зараженных клеток при 2500 g в течение 45 минут. 4. Отмывка клеток питательной средой. 5. Добавление к клеткам ростовой среды, содержащей циклогексимид. 6. Инкубирование клеток в течение двух суток при +36 ° С. 7. Обнаружение хламидий в клетках методом прямой

иммунофлюоресценции или ПЦР. Реальный срок получения результатов этим методом - семь дней.   В настоящее время в литературе растет число сообщений о случаях резистентности хламидий к антибактериальным препаратам (эритромицину, тетрациклину, доксициклину, фторхинолонам). Ценность культурального метода состоит в том, что он является пока единственным методом, позволяющим выбрать антибактериальный препарат для лечения

хламидийной инфекции и оценить эффективность антибактериальной терапии. Схема метода выявления устойчивости хламидий трахоматис к антибактериальным препаратам -Хламидийным изолятом, выделенным от больного при посеве, заражают чувствительные клетки. -К зараженным клеткам добавляют ростовую среду, содержащую антибиотик. -Зараженные клетки инкубируют 5 дней при температуре + 36 ° С. -Чувствительность хламидий к антибиотику

определяется по подавлению инфекции в зараженных клетках. Процедура длительная, занимает по времени две недели.   Диагностика Chlamydia trachomatis методом полимеразной цепной реакции Дороговизна, длительность и трудоемкость микробиологического выделения хламидий в культуре существенно затрудняет использование этой процедуры в рутинной лабораторной диагностике. В литературе накоплен обширный клинико-лабораторный опыт по

использованию метода ПЦР для выявления хламидий трахоматис. Особое внимание при его использовании следует уделять, без сомнения, вопросам правильной интерпретации получаемых результатов. Экстремально высокие показатели чувствительности и специфичности ПЦР делают эту методику во многом революционной в лабораторной диагностике. Основными мишенями при выявлении хламидий трахоматис являются нуклеотидная